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熒光檢測器類型

時間:2019/7/5閱讀:1800
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熒光涉及光的吸收和發射兩個過程,因此任何熒光化合物,都有兩種特征的光譜:激發光譜(excitation spectrum)和發射光譜(emission spectrum)。

激發光譜

熒光屬于光致發光,需選擇合適的激發光波長(Ex)以利于檢測。激發波長可通過熒光化合物的激發光譜來確定。激發光譜的具體檢測辦法是通過掃描激發單色器,使不同波長的入射光激發熒光化合物,產生的熒光通過固定波長的發射單色器,由光檢測元件檢測。終得到熒光強度對激發波長的關系曲線就是激發光譜。在激發光譜曲線的大波長處,處于激發態的分子數目多,即所吸收的光能量也多,能產生強的熒光。當考慮靈敏度時,測定應選擇大激發波長 [1

發射光譜

一般所說的熒光光譜,實際上僅指熒光發射光譜。它是在激發單色器波長固定時,發射單色器進行波長掃描所得的熒光強度隨熒光波長(即發射波長,Em)變化的曲線。熒光光譜可供鑒別熒光物質,并作為熒光測定時選擇合適的測定波長的依據。

另外,由于熒光測量儀器的特性,使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測器的響應等性能會隨波長而變,所以同一化合物在不同的儀器上會得到不同的光譜圖,且彼此間無類比性,這種光譜稱為表觀光譜。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜,則需要對儀器的上述特性進行校正。經過校正的光譜稱為真正的熒光光譜。

激發波長和發射波長是熒光檢測的要參數。選擇合適的激發波長和發射波長,對檢測的靈敏度和選擇性都很重要,尤其是可以較大程度地提檢測靈敏度

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