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1）取鏡和放置：顯微鏡平時存放在柜或箱中，用時從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實驗臺上，鏡座后端距桌邊1－2寸為宜，便于坐著操作。
（2）對光：用拇指和中指移動旋轉器（切忌手持物鏡移動），使低倍鏡對準鏡臺的通光孔（當轉動聽到碰叩聲時，說明物鏡光軸已對準鏡筒中心）。打開光圈，上升集光器，并將反光鏡轉向光源，以左眼在目鏡上觀察（右眼睜開）,同時調節反光鏡方向，直到視野內的光線均勻明亮為止。
（3）放置玻片標本：取一玻片標本放在鏡臺上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉推片器螺旋，將所要觀察的部位調到通光孔的正中。
（4）調節焦距：以左手按逆時針方向轉動粗調節器，使鏡臺緩慢地上升至物鏡距標本片約5毫米處，應注意在上升鏡臺時，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側看著鏡臺上升，以免上升過多，造成鏡頭或標本片的損壞。然后，兩眼同時睜開，用左眼在目鏡上觀察，左手順時針方向緩慢轉動粗調節器，使鏡臺緩慢下降，直到視野中出現清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心，可調節推片器將其調到中心（注意移動玻片的方向與視野物象移動的方向是相反的）。如果視野內的亮度不合適，可通過升降集光器的位置或開閉光圈的大小來調節，如果在調節焦距時，鏡臺下降已超過工作距離（>5.40mm）而未見到物象，說明此次操作失敗，則應重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺。
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