蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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所 在 地蘇州市
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更新時間：2023-06-21 08:23:42瀏覽次數(shù)：102次
聯(lián)系我時，請告知來自 儀表網(wǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞在骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導分化培養(yǎng)基誘導作用下，會逐漸分化成前成脂細胞和脂肪細胞，將形成大小不一的脂滴。油紅O在脂肪中的溶解度大于其在染液中的溶解度，從而使脂肪著色呈現(xiàn)紅色或橘紅色。產(chǎn)品適用于骨髓間充質(zhì)干細胞成脂誘導，能提高誘導效率。
骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導分化培養(yǎng)基
英文名稱：Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit
貨號：BMRS-D101
規(guī)格：200 mL/Kit
質(zhì)檢標準 pH：7.2~7.4
內(nèi)毒素含量：＜10 EU/mL
生物安全：細菌、真菌、支原體檢測陰性
質(zhì)量檢測：誘導測試合格
Rabbit Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Adipogenic Differentiation Kit
貨號：BMRB-D102
規(guī)格：400 mL/Kit
| 使用說明
1. 成脂誘導分化操作
1.1 接種干細胞 取對數(shù)生長期的細胞， 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細胞密度接種至培養(yǎng)器皿，于 37℃， 5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 90~99%，棄掉 上清，加入成脂誘導分化培養(yǎng)基誘導液。
NOTE：如細胞貼壁性較差，建議使用 0.1%明膠對培養(yǎng)底 面進行包被。
1.2 細胞分化誘導 于 37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約 3 天，更 換為成脂誘導分化培養(yǎng)基維持液，培養(yǎng) 1 天后， 再更換為成脂誘導分化培養(yǎng)基誘導液，繼續(xù)培養(yǎng) 3 天。 按照以上換液頻率誘導 14~21 天，并注意觀 察細胞形態(tài)變化。根據(jù)細胞誘導形成的脂滴數(shù)量 和大小，決定終止細胞誘導的時間，并進行染色 鑒定。
2. 染色鑒定
2.1 細胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量 1×PBS 清洗一次，棄去 后取適量 4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室 溫固定 30~60 min，棄去固定液再使用 1×PBS 清 洗兩次。
2.2 油紅 O 染色 取生理鹽水或1×PBS與油紅O原液配制油紅 O工作液（油紅O原液: 生理鹽水=3:2），現(xiàn)用現(xiàn) 配。配制后可對油紅O工作液進行離心，以沉淀 染色液中的過飽和析出物。向清洗干凈的誘導孔 內(nèi)加入適量油紅O工作液，靜置染色30min。吸走 油紅O工作液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1 ×PBS避免細胞干燥。
2.3 誘導評估 顯微鏡下觀察成脂染色效果，并進行圖像采 集和誘導評估。誘導成功時，脂滴與油紅 O 染料 結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細胞的成脂分化水平因細胞類型、細胞供體來 源，培養(yǎng)條件、細胞代次、細胞狀態(tài)和分化時間等因素而異。
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