蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司
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細胞名稱：人膀胱移行細胞癌（STR鑒定正確）細胞簡稱：J82細胞細胞別名： J-82; J 82; J82COT; J82 COT貨號：TCH-C221規格：1×10?cells/T25 培養瓶J82細胞培養基貨號：TCH-G221
J82細胞
細胞名稱：人膀胱移行細胞癌（STR鑒定正確）
細胞簡稱：J82細胞
細胞別名： J-82; J 82; J82COT; J82 COT
貨號：TCH-C221
規格：1×10?cells/T25 培養瓶
參考目錄價格：15 00元 (干冰運輸需另加200元干冰費)
種屬來源：人
組織來源：膀胱
特征：移行細胞癌
細胞形態：上皮細胞樣
生長特性：貼壁生長
培養體系： MEM+10%FBS+1%P/S
J82細胞培養基貨號：TCH-G221
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
培養條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
凍存條件：60%基礎培養基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存
質量檢測：細菌、真菌、支原體檢測均為陰性
J82細胞源自一名58歲膀胱移行細胞癌的白人男性。胞內無橋粒，有大量粗面內質網及突出絨毛，表達ras基因。
J82細胞培養步驟：
使用配套培養基貨號：TCH-G221
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
J82細胞傳代培養方法：
1.盡量吸干凈T25瓶原培養基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞 10-20s，吸走潤洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右，輕輕晃動培養瓶以使鋪勻瓶底細胞層；
4.將培養瓶放入37度培養箱消化；
5.消化到細胞間隙變大，但未脫落時加2-3ml培養基終止消化；
6.混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的培養基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養瓶里；
8.補足培養基，將培養瓶放回培養箱靜置培養；
注意事項 ：不同品牌消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
J82細胞凍存操作步驟：
凍存液：可有使用海星生物的一步凍存液，使用一步凍存法進行細胞凍存。（不需要程序降溫盒）
凍存規格 200-300萬/ml，1ml每管
如果采用程序凍存法的可以參考以下步驟：
1.消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管；
3.將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4 度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入 -80度過夜，第二天轉入液氮保存
J82細胞培養注意事項：
1.凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調整實驗方案
2.由于J82細胞貼壁較弱，消化時間偏短，注意控制消化時間；
3.注意控制細胞密度，過高或者過低都可能影響細胞狀態，不要長時間高密度培養；
4.細胞生長較快，注意及時換液及傳代；
參考文獻：
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O'Toole C, et al. Ultrastructure, karyology and immunology of a cell line originated from a human transitional-cell carcinoma. Br. J. Cancer 38: 64-76, 1978. PubMed: 687519
Fogh J. C*tion, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047
Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484
Bender CM, et al. Inhibition of DNA methylation by 5-Aza-2'-deoxycytidine suppresses the growth of human tumor cell lines. Cancer Res. 58: 95-101, 1998. PubMed: 9426064
The cells form poorly differentiated squamous cell carcinomas.
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