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天根試劑盒-高效植物基因組? ?

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更新時間:2023-04-09 07:58:04瀏覽次數:98次

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產品簡介

天根試劑盒-高效植物基因組采用可以DNA的離心吸附柱自配的裂解緩沖液系統,能夠高效提取多種不同植物組織中的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司新型材料, 高效吸附DNA,可有效去除雜質蛋白。配套的裂解緩沖液可以高效裂解植物細胞,保護DNA的完整性,提高基因組DNA濃度。提取的基因組DNA片段大,純度得率高,質量穩定可靠。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包......

詳細介紹

天根試劑盒- 高效植物基因組

天根DP350


產品介紹


天根試劑盒-高效植物基因組 采用可以DNA的離心吸附柱自配的裂解緩沖液系統,能夠高效提取多種不同植物組織中的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質材料為本公司新型材料, 高效吸附DNA,可有效去除雜質蛋白。配套的裂解緩沖液可以高效裂解植物細胞,保護DNA的完整性,提高基因組DNA濃度。提取的基因組DNA片段大,純度得率高,質量穩定可靠。

使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、 Southern等實驗。



儲存條件

 試劑置于室溫(15-30℃)干燥條件下可保存12個月;更長時間的保存可置于2-8℃。

使用中若產生沉淀,使用前應先將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時間,必要 時可在37℃水浴中預熱10 min,以溶解沉淀。



 產品特點


  • 簡單快速:1 h內即可獲得高質量的基因組DNA。
  •  廣 泛:適用于各種植物組織。
  •  高 純 度:獲得的DNA可直接用于PCR、酶切、雜交等分子生物學實驗。



 注意事項

請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。

 1.樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。

 2.緩沖液FGA可能發黃,并不影響提取效果。

 3.若緩沖液FGA或LP2有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,搖勻后使用。

 4.所有離心步驟均為使用臺式離心機,室溫下離心。

天根試劑盒-高效植物基因組說明書

使用前請先在緩沖液LP3和漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。 

1. 處理材料: 取植物新鮮組織100 mg或干重組織20 mg,加入液氮充分碾磨。加入400 μl緩沖液FGA和 6 μl RNase A(10 mg/ml),旋渦振蕩1 min,室溫放置10 min。

 2. 加入130 μl緩沖液LP2,充分混勻,旋渦振蕩1 min。

 3. 12,000 rpm(~13,400×g)離心5 min,將上清移至新的離心管中。

 4. 加入1.5倍體積的緩沖液LP3(例如500 μl的濾液加750 μl緩沖液LP3) (使用前請先檢查是否 已加入無水乙醇),立即充分振蕩混勻15 sec,此時可能會出現絮狀沉淀。

 5. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中), 12,000 rpm(~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,吸附柱CB3放入收集管中。

 6. 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW (使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。 

注意:如果吸附柱膜呈現綠色,向吸附柱CB3中加入500 μl無水乙醇,12,000 rpm (~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。

7. 重復操作步驟6.

 8. 將吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm (~13,400×g) 離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱 CB3置于室溫放置數分鐘,以晾干吸附材料中殘余的漂洗液。 

注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會影響后續 的酶反應(酶切、PCR等)實驗。

9. 將吸附柱CB3轉入一個干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200 μl洗脫緩 沖液TB,室溫放置2-5 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心2 min,將溶液收集到離心 管中。 注意:為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室溫放置2 min,12,000 rpm(~13,400×g)離心2 min。洗脫緩沖液體積不應少于50 μl,體積過小 影響回收效率。

洗脫液的pH值對于洗脫效率有較大影響。若用ddH2O做洗脫液應保證其 pH值在7.0-8.5范圍內,pH值低于7.0會降低洗脫效率;且DNA產物應保存在-20℃,以防 DNA降解。 

DNA濃度及純度檢測 得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。

回收 得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 

DNA應在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當于大約50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml 單鏈DNA。

 OD260/OD280比值應為1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用ddH2O,比值會偏 低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。



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關鍵詞:離心機 光度計

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