產(chǎn)品介紹:

中文名稱：PAK1抑制劑(IPA-3)

英文名稱：IPA-3

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

貨號(hào)：FS-X10965

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

枯草芽孢桿菌枯草亞種人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子Bacillus thuringiensis小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)

白僵菌人IPO-38蛋白Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

枯草芽孢桿菌人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1Bacillus thuringiensis小鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

銅綠假單胞菌人羰基化蛋白Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

綠色木霉人磷化核因子κB抑制蛋白α（IKKα human ）Bacillus thuringiensis小鼠凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

釀酒酵母人樁蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)

彎孢人小表皮粘蛋白Bacillus thuringiensis小鼠抗凝血受體(ATR)

大腸埃希菌人類似60S核糖體蛋白L21Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)

紫色鏈霉菌人類粘蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠凝血受體(TR)

平滑假絲酵母人MAX二聚化蛋白1Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

硬皮馬勃屬人水閘蛋白14Bacillus thuringiensis小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

銹色野野村氏菌人可溶性半乳糖結(jié)合凝集3Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)

乳粉  沙門(mén)氏菌（陰性）人主要穹窿蛋白Bacillus thuringiensis小鼠磷肌3激(PI3K)

小卷霉人泛蛋白DBacillus thuringiensis小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)

露濕漆斑菌人toll樣受體2Bacillus thuringiensis小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)

根霉年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2Bacillus thuringiensis小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)

少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2抗體豹斑毒鵝膏菌正常大鼠腎細(xì)胞

增食欲B/欲激B亞拉巴馬全緣孔菌非洲綠猴腎細(xì)胞

寡腺合成-1斑點(diǎn)嗜藍(lán)孢孔菌人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株

陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)器1抗體小果雞樅小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P-1（干細(xì)胞庫(kù)保藏）
PAK1抑制劑(IPA-3)日本根霉 2-乙酰α葡萄糖

釀酒酵母 托品酮促性腺抑制

少根根霉 雌三磷化腺活化蛋白激

漢遜德巴利酵母 犬尿喹啉磷化蛋白激A

榆黃菇 β-Tocotrienol增殖相關(guān)蛋白

香菇 3-甲基鄰苯二叉頭蛋白L2

芽孢桿屬 1-氨基茚滿類固生成因子1

哈茨木霉 SorafenibDoublesex和Mab-3相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子

科赫芽胞桿 Sorafenib叉頭型基因P3

大腸埃希 Canertinib (CI-33)腺環(huán)化

釀酒酵母 遠(yuǎn)志擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因子

疣梗青霉 α-托品半胱雙加氧

變異鏈球 咖啡苯乙酯半胱亞磺脫羧

蠟樣芽孢桿 水蘇四糖,四水維生D

三方氏酵母 α-松脂交替氧化