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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TALD人醛縮酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ALD人醛縮酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Aldolase, ALD Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63897 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
化乙酰膽別名: 化乙酰膽;代乙酰膽英文名稱: Acetylcholine iodide: 2260-50-6分子式: C7H16INO2
銨別名: 2,3-二羥基-[R-(R*,R*)]-丁二二銨鹽英文名稱: Ammonium tartra: 3164-29-2分子式: C4H12N2O6
4,4'-二甲亞砜別名: 對(duì)甲基亞砜英文名稱: p-Tolyl sulfoxide: 1774-35-2分子式: (CH3C6H4)2SO
甲醇別名: 芐醇;英文名稱: Benzyl alcohol: 100-51-6分子式: C7H8O
5-溴-5-硝基-1,3-二惡烷別名: 5-溴-5-硝基-1,3-二氧雜環(huán)己烷;5-溴-5-硝基-1,3-二惡烷英文名稱: 5-Bromo-5-nitro-1,3-dioxane: 30007-47-7分子式: C4H6BrNO4
1-溴代萘英文名稱: 1-Bromonaphthalene: 90-11-9單位: 瓶貨期: 2-3天
辛癸甘油酯英文名稱: Decanoyl/octanoyl-glycerides: 65381-09-1儲(chǔ)存條件: RT純度: 99%
1,3-丁二醇別名: 間丁二醇;(±)-1,3-丁二醇;1,3-二羥基丁烷;英文名稱: 1,3-Butanediol: 107-88-0分子式: C4H10O2
ALD人醛縮酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理AP2 alpha/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體IgGβ淀樣肽(1-28)抗體1,3-二甲基-5-吡唑Mouse PI Ab-IgG/IgM (phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit
alpha Adaptin/FITC 熒光素標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgG有絲分裂激酶B抗體3-氨基-4-甲酰胺基吡唑半鹽Mouse PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit
Apaf-1 /FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)IgG軟骨蛋白聚糖抗體3-氨基-4-甲酰胺基吡唑半鹽Mouse P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit
Apaf-1/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)IgG去整合素樣金屬蛋白酶10抗體3-氨基-4-甲酰胺基吡唑半鹽Mouse pERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) ELISA Kit
Protein C/FITC 熒光素標(biāo)記APC活化蛋白C抗體IgG含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族9抗體4-乙酰氨基環(huán)己Mouse PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit
Apelin/FITC 熒光素標(biāo)記脂肪炎癥因子Apelin抗體IgG含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族8抗體4-乙酰氨基環(huán)己Mouse PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit
Apelin receptor/APJ receptor /FITC 熒光素標(biāo)記Apelin receptor抗體IgG植物生長激素ABP1抗體四苯基溴化膦Mouse PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit
APEX1/Ref-1 /FITC 熒光素標(biāo)記氧化還原因子1抗體IgG肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體四苯基溴化膦Mouse LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit
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