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貨號	FS-X10780

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：PTEFb/CDK9抑制劑

英文名稱：BAY-1143572

產品規格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg

貨號：FS-X10780

產品介紹:

BAY1143572是高效選擇性的PTEFb/CDK9抑制劑；抑制AML細胞系的增殖的中間IC50為385nM。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！

號：1414943-88-6

純度：98.0%

分子量：387.43

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

假單胞菌大鼠肌激同工MB Anti-KPBB Antibody人艾柯病IgM(ECHO IgM)

緣彎孢小鼠L選擇Anti-KRT10 Antibody人艾柯病IgM(ECHO IgM)

蒙氏假單胞菌豚鼠卵清蛋白特異性IgGAnti-KRT17 Antibody人抗呼吸道合胞病抗體(RSV)

新疆糖絲菌大鼠活化A受體抗體Anti-KRT13 Antibody人抗呼吸道合胞病抗體(RSV)

膜醭畢赤酵母豚鼠白介4Anti-KRT16 Antibody人麻疹病IgM(MV IgM)

大腸埃希氏菌大鼠腦紅蛋白Anti-KRT15 Antibody人麻疹病IgM(MV IgM)

絳紅褐鏈霉菌人原鈣黏1Anti-KRT10 Antibody人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)

帕莫斯托木層孔菌鮭魚降鈣Anti-KRT2 Antibody人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)

Rhizobium 兔白介6Anti-KRT20 Antibody人柯薩奇病IgG(Cox V-IgG)

根霉屬小鼠粘蛋白/粘液5BAnti-KRT38 Antibody人柯薩奇病IgG(Cox V-IgG)

金黃殼囊孢兔白介10Anti-KRT4 Antibody人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)

三叉爪鬼筆大鼠血小板生成Anti-KRT37/38 Antibody人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)

鷹嘴豆中間根瘤菌小鼠垂體腺環化激活肽Anti-KSR2 Antibody人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)

空腸彎曲桿菌小鼠γ干擾Anti-KRT77 Antibody人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)

珊瑚諾卡氏菌(珊瑚色諾卡氏菌，珊瑚紅諾卡氏菌，小原放線菌)人皮膚T虜獲趨化因子Anti-KSHV ORF57 Antibody人乙型肝炎病前S2抗體(HBV preS2Ab)

枯草芽孢桿菌豚鼠免疫球蛋白GAnti-L1/ORF2 Antibody人乙型肝炎病前S2抗體(HBV preS2Ab)

癌基因RAS相關蛋白Rab25抗體地霉屬小鼠腎集合管細胞

胰腺癌轉移相關蛋白RLLM1抗體果香地霉人直腸腺癌細胞

RNA結合基因蛋白3抗體白地霉人膀胱移行細胞癌

雄激受體相關蛋白24抗體皺褶假絲酵母人肝內膽管癌細胞系
PTEFb/CDK9抑制劑蜂蜜水分檢測裝置孟加拉紅培養基顆粒皮質酮;腎上腺酮

大腸埃希 7.5%肉湯顆粒葡糖氨基葡聚糖

釀酒酵母 Baird-Parker瓊脂基礎顆粒前列環

真灰綠正青霉四硫磺鹽煌綠增液基礎（TTB）顆粒前列腺E2

樺滴孔鹽胱增液（SC）顆粒前列腺F2a

芽孢桿結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）顆粒羥甲基戊二單酰還原

青霉狀粘帚霉乳糖膽鹽發酵培養基顆粒羥脯

枯草芽孢桿煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒去甲腎上腺

卡納霉鏈霉月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯（LST）顆粒固酮

枯草芽孢桿沙氏葡萄糖瓊脂培養基顆粒缺血修飾白蛋白

葉近藤氏酵母沙氏葡萄糖液體培養基顆粒熱休克蛋白27

懷槐多年臥孔大豆酪蛋白瓊脂培養基（TSA）顆粒熱休克蛋白70

美麗鏈霉胰酪胨大豆瓊脂培養基（TSA）顆粒熱休克蛋白90

莖生擬莖點霉胰蛋白胨大豆瓊脂培養基（TSA）顆粒相關血漿蛋白A

洋蔥伯克霍爾德 6-甲氧基-2-四氫萘酮溶
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)