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PI3K抑制劑(GSK2126458)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 16:29:09瀏覽次數:177次

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貨號 FS-X10593
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TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor) 內涎蛋白/內皮唾液蛋白抗原2-烯 99%
TFF3 (trefoil factor3) 三葉肽因子3(多肽)2--3-吡啶 98%
TFPI-2 (tissue factor pathway

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱:PI3K抑制劑(GSK2126458)

英文名稱:GSK2126458

產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg

貨號:FS-X10593

產品介紹:

GSK2126458是一種高選擇性,有效的PI3K抑制劑,抑制p110α/β/δ/γ,mTORC1/2的活性,Ki值分別為0.019nM/0.13nM/0.024nM/0.06nM和0.18nM/0.3nM。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途!

號:1086062-66-9

別名:Omipalisib

純度:99.31%

分子量:505.5

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

谷棒桿菌分泌型白蛋白抑制因子抗體Anti-PRDX4 Antibody接觸蛋白3(CNTN3)

紙葡萄穗霉2,4-二氧乙(除草劑)單克抗體Anti-PRDX4 Antibody(PB0416)接觸蛋白2(CNTN2)

曲霉尿轉運型糖蛋白抗體Anti-PRDX3 Antibody(PB0349)接觸蛋白1(CNTN1)

美澳型核果褐腐病菌雌激誘導的轉錄調制器抗體Anti-PRDX5 Antibody酵母脫氫(SCCPDH)

短桿狀馬賽菌14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型抗體Anti-PRDX5 Antibody(PB0417)窖蛋白3(CAV3)

南非諾卡氏菌2,4-二氧乙(除草劑)抗體Anti-PRF1 Antibody窖蛋白2(CAV2)

乳球菌屬5-羥色受體1A抗體Anti-PRDX6 Antibody(PB0350)窖蛋白(CAV1)

擬無枝菌5羥色抗體Anti-PRG2 Antibody角質轉谷酰(TGM1)

泡盛曲霉5-羥色受體1B抗體Anti-PREB Antibody角鯊烯單加氧(SQLE)

黑曲霉神經突觸2抗體Anti-PRKAB1 Antibody角膜蛋白(KERA)

熒光假單胞菌環指蛋白142抗體Anti-PRKAA1 Antibody角化粒(CDSN)

樹舌靈芝突觸結合蛋白3抗體Anti-PRKAB2 Antibody角化蛋白(CNFN)

蘇云金芽孢桿菌突觸相關蛋白25抗體Anti-PRKAR1A Antibody角化不良蛋白(DKC)

鐮刀菌因子信號傳導抑制蛋白1抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白9(KRT9)

枯草芽孢桿菌超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Anti-PRKCB Antibody角蛋白81(KRT81)

蟻巢傘屬超氧化物歧化2抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白8(KRT8)

神經肽S受體1/G蛋白偶聯受體154抗體Microlunatusphosphovorus小鼠腎動脈內皮細胞提取物

神經調節肽S抗體蜂房類芽孢桿菌小鼠膀胱成纖維細胞提取物

分子生物鐘調控蛋白NOC抗體唐菖蒲伯克霍爾德菌小鼠前列腺上皮細胞提取物

核受體0相關蛋白B家族2抗體變化考克氏菌小鼠膀胱上皮細胞提取物
PI3K抑制劑(GSK2126458)赭色栓 5-溴-2-甲氧基吡啶錳超氧化物歧化

枯草芽胞桿枯草亞種 3,5-二溴-2-羥基吡啶含錳核糖核還原

田無鏈霉 2-羥基-5-吡啶精

谷棒桿 2-甲氧基-3,5-二溴吡啶甘油二酯

頭狀禿馬勃 化釔雙核精

綠黃鏈霉 2-羥基-4-脂多糖;內

Aeromonas aquariorum 3--2-羥基吡啶磷化MEK1;2

林生毛霉 硫釤(III),八水合物磷化外信號調節激

美澳型核果褐腐病 化釤,六水磷化絲裂原活化蛋白激1

密歇根棍狀桿標記亞種 溴化鎘,四水磷化真核起始因子結合蛋白1

甜菜慢生根瘤 硫銦磷化含ETS域Elk1蛋白

枯草芽孢桿 化鎳磷化外信號調節激1;2

枯草芽胞桿枯草亞種 溴化鎳磷化絲裂原活化蛋白激
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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