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貨號 | FS-X10409 |
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中文名稱:GSH過氧化物酶4抑制劑(RSL3)
英文名稱:RSL3
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10409
產品介紹:
英文名稱:RSL3 產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg RSL3是GSH過氧化物酶4的抑制劑,能夠阻礙GSH的合成,IC50值是100nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1219810-16-8 別名:1S,3R-RSL3 純度:99.59% 分子量:440.88 結構式: RSL3 1S,3R-結構式 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Micrococcus yunnanensis蛋白激C亞型G抗體Anti-APCS Antibody激M2型同工(M2-PK)
灰黃鏈霉菌磷化蛋白激C亞型G抗體Anti-APEX2 Antibody激(PK)
葉點霉磷化蛋白激C亞型G抗體Anti-APLP1 Antibody(MGO)
膠孢肝再生磷酯1抗體Anti-APH1A Antibody二單酰(malonyl CoA)
Microbacterium terricola磷酯3蛋白抗體Anti-APEX2 Antibody二(MDA)
黃孢紫紅菇果糖-2,6-二磷心肌抗體Anti-API5 Antibody轉/谷轉(ALT/GPT)
齊藤隱球酵母磷變位1抗體Anti-APLN Antibody別孕烯/3α,5α-四氫孕(AP/3α,5α-THP)
寡氧單胞菌磷激1抗體Anti-APLP1 Antibody表皮生長因子受體(EGFR)
蠟樣芽孢桿菌羧化抗體Anti-APLP2 Antibody表皮活化肽因子(CAPF)
金針菇F39脫氫復合物X蛋白抗體Anti-APOA1 Antibody表皮生長因子樣結構域蛋白7(EGFL7)
根瘤菌磷烯羧激抗體Anti-APLP1 Antibody表皮生長因子(EGF)
紅色鹽顆粒形菌果糖-2,6-二磷1抗體Anti-APOA1 Antibody表皮角蛋白(EK)
籬邊粘褶菌磷化6磷果糖激抗體Anti-APOA1 Antibody(PB0887)表面膜免疫球蛋白M(mIgM)
松鼠葡萄球菌松鼠亞種p21蛋白抗體Anti-APOB Antibody表面膜免疫球蛋白D(mIgD)
丁梭菌(丁桿菌)P選擇糖蛋白配體1抗體Anti-APOB Antibody(PB1096)表面膜免疫球蛋白A(mIgA)
釀酒酵母絲蛋白2抗體Anti-APOA1 Antibody(PB0888)表面活性蛋白D(SP-D)
木霉Trichoderma│sp. 質量規格:>98%,BR
曲霉Aspergillus│oryzae 質量規格:含量98~101%,BR
擬青霉Paecilomyces│sp. 質量規格:>98%,標準品
GSH過氧化物酶4抑制劑(RSL3)毛霉屬 N-Phenyl-benzimidoyl chloride血小板衍化生長因子AB
皺褶莫氏黑粉 2-巰基甲酯溶血
淺黃色假單胞 5-甲氧基苯并咪唑磷脂酰乙
植物乳桿 二甲尿
燕麥嗜西瓜亞種* 4-溴甲基喹啉-2-酮卵泡
大果毛殼 3-巰基脂肪
Actinomonospora 4-喹啉羧過氧化物
炭疽芽胞桿 3-茴香硫細小病
殺結節鏈霉 3--5-氟苯鵝細小病
大腸埃希 2,3-二吡1-3-β-D葡聚糖
費氏中華根瘤 2-(甲基)苯并咪唑鵝細小病抗體
三鏈霉 2-羥并咪唑加壓
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 2-(二苯基膦基)乙半胱蛋白8
阿薩希絲孢酵母 N4-苯甲酰基-2'-脫氧胞半胱蛋白9
猶他游動放線 2,2-二甲基-3-羥基酪
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