當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TET人內毒素ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | ET人內毒素ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human endotoxin, ET Elisa Kit |
貨號 | FS-H63758 |
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Streptomyces│griseoaurantiacus 灰橙鏈霉菌Streptomyces│griseoaurantiacus分離基物:土壤/近海紅樹林土壤凍干物模式菌株:no可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Massilia│timonae 蒂莫內馬賽菌Massilia│timonae分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no耐鹽機制的研究471生長條件:37℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構體類的混合物總和)
Nocardiopsis│dassonvillei 達氏擬諾卡氏菌Nocardiopsis│dassonvillei分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no生物活性微生物/抗腫瘤活性12生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構體類的混合物總和)
Sphingopyxis│baekryungensis 查樸圖鞘氨醇盒菌Sphingopyxis│baekryungensis分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:,用于分類學研究。471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%(支鏈異構體類的混合物總和)
Maribaculum│marinum 海洋海棒狀菌Maribaculum│marinum分離基物:樣/深海樣斜面培養物安全等級:1模式菌株:no芳烴萘,菲等降解菌,可用于生物修復。471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Thalassospira│sp. 海旋菌Thalassospira│sp.分離基物:樣/表層海凍干物安全等級:1模式菌株:no潛在石油烴類降解菌/生物活性物質篩選471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Oceanisphaera│donghaensis 東海大洋球形菌Oceanisphaera│donghaensis分離基物:樣/上層海凍干物安全等級:1模式菌株:no產酶微生物/木聚糖酶471生長條件:25℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Algoriphagus│ornithinivorans 食鳥氨噬冷菌Algoriphagus│ornithinivorans分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物模式菌株:no抗重金屬砷,可用于抗砷機制的研究;可用于生物修復。745生長條件:18-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:D,99%
ET人內毒素ELISA試劑盒實驗原理Reprimo 質內的糖基化蛋白抗體白綿馬素AP磺銀Mouse IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit
C-REL 淋巴衍生C-型凝集素抗體知母皂苷B乙基化鎂Mouse IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit
RGS2 G蛋白信號轉導調節因子2抗體知母皂苷E乙基化鎂Mouse TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
RGS5 G蛋白信號轉導調節因子5抗體牛蒡苷元3,4-環氧環己基-3,4-環氧環己酯Mouse VEGF (Vascular Endothelial cell Growth Factor) ELISA Kit
RhoA RhoA抗體蒼術素N,N’-二環己基脲Mouse TGF-β1 (Transforming Growth Factor β1) ELISA Kit
Rho C RhoC抗體苯甲酰芍藥苷N,N’-二環己基脲Mouse CRP (C-Reactive Protein) ELISA Kit
RIP2 受體結合絲氨蘇氨激酶2抗體β-桉葉3--4-(基)Mouse INS (Insulin) ELISA Kit
Phospho-RIP2 (Ser176) 磷化受體結合絲氨蘇氨激酶2抗體環黃芪3--4-(基)Mouse I-TAC (Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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