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人ELISA檢測試劑盒五個基本原理

時間:2021/7/16閱讀:344
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酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。人ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。

人ELISA檢測試劑盒基本原理如下:

1、將特定抗體(一抗)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測抗體的抗體,識別待測抗體。

2、二抗是一種與酶偶聯的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識別并結合待測抗體。

3、測定時,固定的一抗先與樣品稀釋液反應,將樣品中待測抗體固定;洗滌后再與二抗反應。每一步之間都要進行洗滌。

4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變為有色產物。

5、產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺有無定性或定量分析。

注意:洗滌不是反應步驟,卻是決定成敗的關鍵。目的是洗去反應液中沒有與固相抗體結合的物質以及在反應中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。

 

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