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elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)常用的規(guī)則是什么?

時(shí)間:2018/9/10閱讀:391
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elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)常用的規(guī)則是什么?
ELISA是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。它是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。以下是對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的通用步驟的簡(jiǎn)單說明。
實(shí)驗(yàn)通用步驟:
(1)、要保證移液槍的性,偏差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行判定。如果有專業(yè)人員進(jìn)行糾正更好。
(2)、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。提取不一樣的液體后,要更換槍頭。即使是提取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)也一樣。
要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使效果更安穩(wěn)。 
(3)、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光儲(chǔ)存。
(4)、用槍提取液體時(shí)速度不能太快,避免生成氣泡而使提取量不。
(5)、提取液體時(shí),要用量程和需要量相近的槍去吸,減小偏差數(shù)值。
(6)、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
(7)、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕搖晃30秒,是液體緩和均勻。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功用。
(8)、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,避免水分的蒸發(fā)。
(9)、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
(10)、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行制作PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)時(shí)間保存。
(11)、底物是光敏感的,需要在臨用前現(xiàn)配。
(12)、檢測(cè)前,要翻開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
(13)、底物有一定的毒性,中止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
(14)、待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響效果的性。
(15)、溫浴時(shí)間應(yīng)遵循試劑盒規(guī)定。
(16)、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才華保證數(shù)據(jù)的性。
(17)、對(duì)效果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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