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人膽管細胞型肝癌細胞

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  • 更新時間2016-06-27
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上海基免實業有限公司成立于2008年,經過數年的努力已迅速成為集科研和生產為一體的專業化生物工程公司。特別是ELISA研發這一產品已使上海基免成為中國公司。

公司產品涵蓋ELISA研發、細胞培養,各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養基、自產實驗室耗材、小型儀器等。此外、上海基免還代理了sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega,Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類公司的產品。

上海基免將進一步加強人才經營、產品經營,不斷提升企業的核心竟爭力,實現具有高科技產業體系、知識化創業團隊的化的公司,服務于生命科學領域,迎接世界經濟一體化所帶來的機遇與挑戰。
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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日人膽管細胞型肝癌細胞保存到液氮中。
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【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。
如何選用特殊細胞系培養基?
培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始,各種目的無血清培養*AIM V(12005)培養基(SFM)。
L-*在細胞培養中重要嗎?它在溶液中不穩定嗎?
L-*在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。
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如何用臺盼蘭計數活細胞?
用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鐘后,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
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