產品名稱 | 原代人小氣道上皮細胞 | 英文名稱 | Human Small Airway Epithelial Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X0725 |
組織來源 | 小氣道組織 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人小氣道上皮分離自小氣道；臨床上通常將內徑小于2mm的小細支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點。在平靜吸氣時，空氣進入狹窄的鼻咽部，產生渦流。由于小氣道已無軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續呼吸道內層，作為隔絕外界有害物質的物理和功能屏障發揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細胞在功能上能夠調節免疫反應、產生化學因子進行宿主防御、表達粘附分子，并可能通過HLA-DR表達呈遞抗原；它們還能產生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞；小氣道上皮細胞的培養可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點：①小氣道阻力小；②氣流速度慢；③可調節控制通氣與血流比例。
方法簡介：
公司實驗室分離的人小氣道上皮采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人小氣道上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預冷的PBS中，盡可能的除去結締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養瓶中，倒置于細胞培養箱中，
4) 2h后，培養瓶中注入2 mL內皮培養基，小心將培養瓶正置于培養箱，確保組織塊不會飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細胞融合達到60-70%左右時，去除組織塊，將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
耐長春新堿結腸癌細胞,VCR終濃度1μg/ml | 耐5氟結腸癌細胞 |
視網膜母細胞瘤 | 霍亂弧菌 O1/O139/CTX 群檢測試劑盒 ( 三重熒光 PCR 法 ) |
白血病耐藥株 | 諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / Ⅳ型檢測試劑盒( 三重熒光 PCR 法 ) |
敘利亞倉鼠細胞系 | 諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / 輪狀病毒 A 組檢測試劑盒 ( 三重熒光 PCR 法 ) |
中國倉鼠卵巢懸浮細胞 | 諾如病毒Ⅰ型 / Ⅱ型 / 札如病毒檢測試劑盒 ( 三重熒光 PCR 法 ) |
骨肉瘤細胞 | 副溶血性弧菌毒力基因( TLH/TDH/TRH )檢測試劑盒( 三重熒光 PCR 法 ) |
人肝癌細胞 | 沙門氏菌 / 單核細胞增生李斯特菌 / 副溶血性弧菌檢測試劑盒( 三重熒光 PCR 法 ) |
BRL-3A大鼠肝細胞 | 大腸桿菌 O157/ 單核細胞增生李斯特菌 / 副溶血性弧菌檢測試劑盒( 三重熒光 PCR 法 ) |
小鼠纖維原細胞 | 腸道腺病毒 / 人星狀病毒 / 札如病毒檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
人腦瘤細胞 | 輪狀病毒 A 組 /B 組 /C 組檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
小鼠骨髓瘤細胞 | 腸道病毒通用 / 人博卡病毒檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
人神經母細胞瘤細胞 | 副溶血性弧菌 /GS-VP 流行株檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
人結腸癌氟耐藥株 | 原代人小氣道上皮細胞人星狀病毒 / 札如病毒檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
小鼠成纖維細胞 | 耶爾森菌 / 志賀氏菌檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
H7 亞型流感病毒檢測試劑盒 | 副溶血性弧菌 / 單核細胞增生李斯特菌檢測試劑盒( 雙重熒光 PCR 法 ) |
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養瓶，75%酒精擦拭培養瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜，以穩定細胞狀態，然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml培養基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）待細胞貼壁后，觀察培養結果，之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時，棄25cm2培養瓶中的培養液，用PBS清洗細胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落，再加入培養液終止消化，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當量的凍存液（基礎培養基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養液5ml混勻細胞，然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細胞培養箱中培養；
4）第二天，換用新鮮培養基繼續培養。
