產品名稱 | 貨號 | A01X938 | |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 | 英文名 | RWPE2:RWPE-2 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | RWPE-2 |
組織來源 | 前列腺 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
RWPE-2細胞是由Webber·M·M于1996年建株。 | |
生物安全等級 | 2 [Cells contain Human Papilloma viral (HPV) sequences] |
生長培養基 | K-SFM＋0.05mg/mL BPE＋5ng/mL EGF＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
致瘤性 | Yes, in nude mice. Yes, in soft agar. |
受體表達情況 | androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen) |
抗原表達情況 | kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen) |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業或科研等非醫療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
辣根過氧化物酶標記的前列腺素E受體蛋白4抗體 英文名；EP4, HRP conjugatedATP依賴RNA解旋酶DDX46抗體 英文名；DDX46
辣根過氧化物酶標記的神經絲蛋白單克隆抗體 英文名；AD7c-NTP, HRP conjugatedATP依賴RNA解旋酶DDX47抗體 英文名；DDX47
辣根過氧化物酶標記的脫氧核糖核酸酶γ抗體 英文名；DNase gamma, HRP conjugatedATP依賴RNA解旋酶DDX49抗體 英文名；DDX49
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗Human IgE單克隆抗體 英文名；Anti-Human IgE / HRPATP依賴RNA解旋酶DDX50抗體 英文名；DDX50
辣根過氧化物酶標記的一氧化氮合成酶-2（誘導型）抗體 英文名；iNOS, HRP conjugatedATP依賴RNA解旋酶DDX52抗體 英文名；DDX52
辣根酶標記β2-微球蛋白單克隆抗體 英文名；beta 2 Microglobulin (7B5)/HRPATP依賴RNA解旋酶DDX54抗體 英文名；DDX54
RWPE-2 人前列腺正常細胞辣根酶標記的口蹄疫病毒O型VP1單克隆抗體 英文名；FMDV VP1 protein (type O)/HRPATP依賴RNA解旋酶DDX55抗體 英文名；DDX55
辣根酶標記的綠色熒光蛋白TurboGFP單克隆抗體 英文名；TurboGFP, HRP conjugatedATP依賴RNA解旋酶DDX56抗體 英文名；DDX56
辣椒素受體5抗體 英文名；TRPV5ATP依賴RNA解旋酶DDX59抗體 英文名；DDX59
辣椒素受體抗體 英文名；TRPV1ATP依賴RNA解旋酶DDX60抗體 英文名；DDX60
辣椒素受體樣蛋白1抗體 英文名；TRPV2ATP依賴RNA解旋酶DDX60樣蛋白抗體 英文名；DDX60L
萊克多巴胺單克隆抗體 英文名；RactopamineATP依賴RNA解旋酶DDX6抗體 英文名；DDX6
萊姆病螺旋體抗體 英文名；outer surface protein AATP-依賴的RNA解旋酶29抗體 英文名；DHX29
操作步驟:
(1) 細胞系培養：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養液，37℃ CO2培養密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養液繼續培養。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
