隨著基因組研究的不斷推進(jìn)，單分子實(shí)時(shí)測(cè)序系統(tǒng)以PacBio測(cè)序?yàn)榇淼牡谌驕y(cè)序技術(shù)逐漸應(yīng)用到多個(gè)科研領(lǐng)域。該平臺(tái)利于單分子實(shí)時(shí)測(cè)序技術(shù)，又稱作SMRT測(cè)序，基于納米小孔的單分子讀取技術(shù)，無需擴(kuò)增即可快速完成序列讀取。PacBio Sequel測(cè)序儀是美國太平洋生物技術(shù)公司基于PacBio RSII平臺(tái)的基礎(chǔ)上，新推出的第三代測(cè)序平臺(tái)，該系統(tǒng)以測(cè)序通量高、單Gb數(shù)據(jù)成本低、周期短而突出于RSII平臺(tái)。
單分子實(shí)時(shí)測(cè)序建立在兩項(xiàng)關(guān)鍵的技術(shù)創(chuàng)新之上，克服了測(cè)序領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)。
1、零模波導(dǎo)孔技術(shù)只允許激光照亮反應(yīng)孔底部，也就是DNA聚合酶和模板復(fù)合物固定的位置。
2、熒光基團(tuán)標(biāo)記在核苷酸的三磷酸末端，不僅可以模擬天然DNA鏈合成過程，而且可以實(shí)時(shí)記錄復(fù)合物上堿基摻入的順序。
§ 單分子實(shí)時(shí)測(cè)序系統(tǒng)特點(diǎn)：
單分子實(shí)時(shí)測(cè)序技術(shù)可以提供長讀長序列和均一覆蓋度的數(shù)據(jù)，完成迄今為止更為全面的基因組從頭組裝。真正的全基因組測(cè)序應(yīng)該為基因組中所有類型的變異提供完整且準(zhǔn)確的信息，包括結(jié)構(gòu)變異、可移動(dòng)元件、單體型、低復(fù)雜度區(qū)域以及表現(xiàn)遺傳學(xué)修飾。
? 超越基因組草圖，產(chǎn)生Mb大小的contigs和完整基因組拼接；
? 獲得SNPs及其他基因組變異；
? 呈現(xiàn)基于擴(kuò)增的測(cè)序技術(shù)無法獲得的基因組區(qū)域；
? 包含啟動(dòng)子區(qū)的完整基因模型注釋；
? 獲得二倍體基因組的單體型信息；
? 捕獲表現(xiàn)遺傳學(xué)信息。
