參數規格：
產品名稱：禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒
產品貨號：YS-P013458
產品規格：50次
產品分類：PCR檢測試劑盒
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．公司產品僅用于科研對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
特點優勢：
1. 特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3. 靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
大鼠白介素27(IL-27)2,2'-雙(三氟)二氨聯(98.0%)雙特異性蛋白磷酸酶26抗體（絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶8）
大鼠白介素32(IL-32)1,3-二咔唑-9-(98%)阿米洛利結合蛋白1抗體
大鼠腸脂肪酸結合蛋白(IFABP/FABP2)(AR,≥99.5%)S期激酶活化蛋白DBF4A抗體
大鼠粘蛋白2(MUC2)(CP,≥99%)著絲粒相關蛋白DSN1抗體
大鼠雙調蛋白(AR)(anhydrous,99.8%)雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體
大鼠腎損傷分子1(KIM-1)(ACS,≥99.0%)神經干樹突調節蛋白DAGLα抗體
大鼠乳酸脫氫酶(LDH)2,2′-雙溴雙(98.0%)對接蛋白4抗體
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)氯(無水級, 99.5%)DULLARD蛋白抗體
大鼠纖維連接蛋白(FN)4-氟溴(97%)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MNB抗體
大鼠低密度脂蛋白(LDL)2-溴-6-氨吡啶(98%)無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵因6抗體
大鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP-1)3-氨-2-氟吡啶(95%)朊蛋白DPL抗體
大鼠低密度脂蛋白免疫復合物(LDL-IC)2-氯-3-氟吡啶(98%)肌強直性營養不良蛋白激酶抗體
大鼠瘦素(LEP)2,2′-聯吡啶-3,3′-二(98%)有絲分裂控制蛋白dis3抗體
大鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)4'-(4-溴)-2,2':6',2''-三聯吡啶(97.0 %)肝癌新因3蛋白抗體
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)5-溴-2-吡啶(95%)Dapper2蛋白抗體
大鼠白血病抑制因子(LIF)4-(Boc-氨)-3-吡啶(96%)Dapper3蛋白抗體
禽正呼腸孤病毒RT-PCR試劑盒MIDN 中腦核仁蛋白抗體硒粉 99.9% metals basis,200目
Midkine 中期因子/肝素結合生長因子抗體二氧化硒 AR，99%
MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體碲 99.99% metals basis
MLK3 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體4-二氨吡啶 99%
Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MLK3抗體N-羥鄰二酰亞 98%
MYL1/MYL2 肌球蛋白輕鏈1/2抗體2-巰-5--1,3,4-噻二唑 99%
Phospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體2-巰并咪唑 98%
MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白輕鏈3抗體鄰二酰亞 99%
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
