ERBB家族抑制劑(Dacomitinib)正在熱銷的產(chǎn)品：CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介2受體β鏈抗原反式-3-(硅)烯 97%
MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬炎癥蛋白2抗原3-硅氧-1-炔 97%
MMP-13 (Mat
產(chǎn)品介紹:
Dacomitinib是一種特異性的不可逆抑制劑ERBB家族抑制劑，作用于EGFR，ERBB2和ERBB4，IC50分別為6nM，45.7nM和73.7nM。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：1110813-31-4 別名：PF-00299804;PF-299804 純度：99.91% 分子量：469.94 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
英文名稱：Dacomitinib
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號(hào)：FS-X10568
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
棕黑腐質(zhì)霉花生四烯15脂氧合2抗體Anti-NOGOR(RTN4R) Antibody腦膜瘤基因1(MN1)
毛腿環(huán)銹傘硫氧還蛋白還原抗體Anti-Nogo A/RTN4 Antibody腦富含膜附著信號(hào)蛋白1(BASP1)
球孢白僵菌5-羥色受體2C抗體Anti-NOL3 Antibody腦啡肽2(NEP2)
蕈狀芽孢桿菌5-羥色受體5B抗體Anti-NONO Antibody腦啡肽(NEP)
黑曲霉絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體Anti-NOS1 Antibody腦多巴神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CDNF)
維及尼鏈霉菌絲/精相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體Anti-NOS1 Antibody腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)
曲霉磷化絲/蘇蛋白激II β(casein kinase IIβ)抗體Anti-non-muscle Myosin IIB/MYH10 Antibody腦蛋白44(BRP44)
四川散斑殼單核蛋白5抗體Anti-NOS2 Antibody囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子(CFTR)
健康皮張抗原SAMD9蛋白抗體Anti-NOS2 Antibody囊泡乙酰轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(VAChT)
尖孢鐮刀菌SARM1蛋白抗體Anti-NOS3 Antibody囊泡單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(VMAT2)
間型彎孢染色質(zhì)組裝因子1P155抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐氧化性能蛋白1(OXR1)
鏈格孢蛙皮降壓肽抗體Anti-NOTCH2 Antibody耐扭蛋白3A(TOR3A)
哈茨木霉信號(hào)誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1樣蛋白2抗體Anti-NOTCH1 Antibody耐扭蛋白2A(TOR2A)
滑菇、光帽黃傘DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體Anti-NOTCH4 Antibody耐扭蛋白1B(TOR1B)
橙色綠屈擾菌絲/蘇蛋白激SRPK2抗體Anti-NOVA1 Antibody耐扭蛋白1A(TOR1A)
猴頭分化蛋白SEPT8抗體Anti-NOVA2 Antibody鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NCCT)
視神經(jīng)相關(guān)蛋白1抗體簡(jiǎn)單芽孢桿菌人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體玫瑰色孫修琴菌人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子3抗體綠針假單胞菌橙色亞種人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
嗅覺(jué)受體家族5亞基1抗體嗜鹽螺旋桿菌人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物
ERBB家族抑制劑(Dacomitinib)三葉草根瘤 3-氟-4-甲氧基苯鐵蛋白
Acinetobacter soli 雙(六氟乙基酮)合鎳(II)，水合磷肌激
少根根霉原變種 甲次硫鈉 水合物病性關(guān)節(jié)炎抗體
異常漢遜酵母 3-磺基十四烷基二甲基網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病抗體
野牡丹尼爾氏酵母 亞鈣水合物可溶性Toll樣受體4
球孢白僵 鹽芐絲肼整合β1
大腸桿 化鈥(III)六水合物纖調(diào)蛋白
芽孢桿 反式二氨基二化鉑(II), Pt minE鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白
黑曲霉 磷鑭(III) 水合物 (REO)拓?fù)洚悩?gòu)2
佛雷德里克斯堡假單胞 2-羧基苯鈣結(jié)合蛋白
釀酒酵母 3，5-二甲基-4- 硝基吡啶-2-甲β-骨膠原交聯(lián)
芹側(cè)耳（杏鮑菇） 乙二四乙鐵鈉鹽纖維蛋白
枯草芽孢桿 三氟磺鋱(III)水合物纖連蛋白
大腸埃希氏 Fmoc--4-甲不飽和脂肪
薄花邊傘 鹽伊伐布雷定神經(jīng)肽Y
