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Human Estrogen-in
中文名稱：胸苷磷酸化酶抑制劑(TFT)
英文名稱：Trifluorothymidine
產品規格：1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
貨號：FS-X10784
產品介紹:
Trifluorothymidine是胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase）抑制劑，還能抑制胸苷酸合成酶（thymidylate synthase）。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：70-00-8 別名：Trifluridine;FTD;5-Trifluorothymidine;NSC 529182;NSC 75520 純度：99.69% 分子量：296.2 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
木賊鐮孢乙型肝炎e抗原Anti-LPAR5 Antibody人反狀腺原(rT3)
根瘤菌乙型肝炎e抗體Anti-LRG1 Antibody人反狀腺原(rT3)
美澳型核果褐腐病菌乙型肝炎核心抗體Anti-LPCAT2 Antibody人6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
韓國假單胞菌乙型肝炎核心抗體 IgMAnti-LRP10 Antibody人6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)
蛹蟲草（北冬蟲夏草、北蟲草）（可訂購）促黃體生成Anti-LRP10 Antibody人戊糖(Pentosidine)
緊密毛霉促卵泡生成Anti-LRP3 Antibody人戊糖(Pentosidine)
固氮螺菌屬催乳Anti-LRP11 Antibody人變腎上腺(MN)
谷棒狀桿菌孕Anti-LRRC41 Antibody人變腎上腺(MN)
鞘盒菌屬游離T4Anti-LRRC41 Antibody人多巴D1受體(D1R)
堅硬芽孢桿菌狀腺原（T3）Anti-LRRK1 Antibody人多巴D1受體(D1R)
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種G Fc段受體ⅡAnti-LTB Antibody人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)
葡萄座腔菌兔粒集落激因子Anti-LTB Antibody人腎上腺能a1A受體(ADRA1A)
枯草芽孢桿菌甲狀腺（T4）Anti-LTBR Antibody人早老2(PS-2)
粉紅單端孢霉魚類主要組織相容性復合體Anti-LTO1 Antibody人早老2(PS-2)
檸檬黃色農球菌大鼠c-Jun基末端激Anti-LTK Antibody人異腎上腺(iso-Hyd)
油菜菌核病菌小鼠絲/蘇蛋白磷Anti-LUC7L2 Antibody人異腎上腺(iso-Hyd)
畸胎瘤癌基因RAS相關抗體反曲毛殼小鼠髓樣乳腺癌細胞
Ras-GTP激活蛋白3抗體橄欖包毛殼大鼠肝竇內皮細胞
RAS相關GTP結合蛋白A抗體球毛殼L-WRN
G蛋白家族RAB21蛋白抗體長刺毛殼正常人表皮角質形成細胞
胸苷磷酸化酶抑制劑(TFT)金針菇（毛柄、冬菇） 含90ml磷鹽緩沖液均質袋血清鐵
枯草芽孢桿 改良CCDA瓊脂平板（9cm）血清總補體
黃曲霉 甲基烯四氫糠基酯血栓A2
孢小克銀漢霉輪生變種 改良CCDA瓊脂平板（9cm）血栓B2
糙孢曲霉 BCYE-CYS瓊脂平板（9cm）血栓調節蛋白
假絲酵母屬 甘露卵黃多粘瓊脂平板（9cm）血小板活化因子
淡紫擬青霉 2-甲基-6-乙基苯(MEA)血小板膜糖蛋白Ⅱb;Ⅲa
伯頓絲孢畢赤酵母 改良Skirrow氏瓊脂平板（9cm）血小板衍生生長因子
彩色豆馬勃 TSA培養基平板（9cm）血小板衍生生長因子AB
土曲霉 含青霉TSA培養基平板（7cm）氧化低密度脂蛋白
枯草芽孢桿 2,6-二異基苯（DIPA）
柱形胞鏈霉 NA平板（加青霉）（9cm）一氧化氮
多形布勒擔子酵母 我妻氏血瓊脂平板（9cm）一氧化氮合成
多噬伯克霍爾德氏 慶大霉瓊脂平板（9cm）胰島
根霉 玫瑰紅鈉瓊脂平板（9cm）胰島樣生長因子2
