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增強型CCK-8試劑盒

參考價
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具體成交價以合同協議為準
  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-09
  • 廠商性質經銷商
  • 入駐年限8
  • 實名認證已認證
  • 產品數量9988
  • 人氣值256309
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上海撫生實業有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。


上海撫生實業有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。






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貨號FS-X9531
增強型CCK-8試劑盒正在熱銷的產品:果糖含量測試盒 規格:100管/96樣 測試方法:微量法
果糖含量測試盒 規格:50管/48樣 測試方法:可見分光光度法
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吲哚乙酸氧化酶活性檢測試劑盒
增強型CCK-8試劑盒 產品詳情

產品介紹:

本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒,比普通的CCK-8試劑盒具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。

WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。

WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩定。

本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。

本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的增強型CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

WST-8對細胞無明顯毒性。加入增強型CCK-8溶液顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到佳測定時間。

中文名稱:增強型CCK-8試劑盒

英文名稱:Enhanced Cell Counting Kit-8

產品規格:100次|500次|2500次|10000次

貨號:FS-X9531

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

甘氨酰tRNA合成酶(GARS)檢測試劑盒  forGlycyltRNASynthetase(GARS)    

鈣黏蛋白22(CDH22)檢測試劑盒  forCadherin22(CDH22)    

細胞色(CYCS)檢測試劑盒  forCytochromeC,Somatic(CYCS)    

膽綠素還原酶A(BLVRA)檢測試劑盒  forBiliverdinReductaseA(BLVRA)    

Neurensin1蛋白(NRSN1)檢測試劑盒  forNeurensin1(NRSN1)    

克拉拉細胞蛋白16(CC16)檢測試劑盒  forClaraCellProtein16(CC16)    

視網膜鈣黏附蛋白(RCAD)檢測試劑盒  forCadherin,Retinal(RCAD)    

轉化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(TRPV2)檢測試劑盒  forTransientReceptorPotentialCationChannelSubfamilyV,Member2(TRPV2)    

芳香烴受體(AhR)檢測試劑盒  forArylHydrocarbonReceptor(AhR)    

布皮質素3(BEST3)檢測試劑盒  forBestrophin3(BEST3)    

Ⅰ(CA1)檢測試劑盒  forCarbonicAnhydraseI(CA1)    

絲切蛋白2(CFL2)檢測試劑盒  forCofilin2,Muscle(CFL2)    

干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒  forInterferonBeta(IFNb)    

前列腺素E受體2(EP2)檢測試劑盒  forProstaglandinEReceptor2(EP2)    

組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒  forHistoneH2B(H2B)    

25kDa突觸關聯蛋白(SNAP25)檢測試劑盒  forSynaptosomalAssociatedProtein25kDa(SNAP25)    

骨橋素(OPN)檢測試劑盒  forOsteopontin(OPN)    
增強型CCK-8試劑盒磷妥英鈉標準品  規格:250mg  英文名稱:Fosphenytoin Sodium

氟烷相關物質C標準品  規格:0.2ml  英文名稱:

卡維地相關物質B標準品  規格:15mg  英文名稱:

孢地尼標準品  規格:200mg  英文名稱:Cefdinir

牡荊樹提取物標準品  規格:1.5g  英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract

尼替丁相關物質A標準品  規格:50mg  英文名稱:

萘標準品  規格:200mg  英文名稱:Naphthalene

度西汀雜質A標準品  規格:10mg  英文名稱:

扁桃酸標準品  規格:500mg  英文名稱:Mandelic Acid (AS)

羧甲基淀粉鈉標準品(A型)  規格:400mg  英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type A

 


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