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產品介紹:
FGF-401是FGFR4的抑制劑，IC50值為1.9nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ 號：1708971-55-4 純度：98.0% 分子量：506.56 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
中文名稱：FGFR4抑制劑(FGF-401)
英文名稱：FGF-401
產品規格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號：FS-X10808
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
鼠傷門氏菌小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類Anti-NHLH1 Antibody人同型半胱(Hcy)
釀酒酵母小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白Anti-NKTR Antibody人同型半胱(Hcy)
矮棒曲霉人白介27Anti-NID1 Antibody人游離脂肪(FFA)
發酵畢赤酵母大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體Anti-NKX2-1 Antibody人游離脂肪(FFA)
釀酒酵母人白介28Anti-NIFK Antibody人骨粘連蛋白(ON)
棘孢曲霉人白介29Anti-NKX2-6 Antibody人骨粘連蛋白(ON)
墨西哥畢赤酵母大鼠凋亡誘導因子Anti-NKX2-4 Antibody人葉(FA)
枯草芽孢桿菌人白介23Anti-NKX2-6 Antibody人葉(FA)
暗黑鏈霉菌小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人內(ET)
雙孢蘑菇小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類Anti-NKX3-1 Antibody人內(ET)
光滑青霉人巨噬移動抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
居巖牙殖球菌大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-NKX6-3 Antibody人過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
環柄菇人組織因子途徑抑制物Anti-NLRX1 Antibody人環孢A(CsA)
擬青霉小鼠可溶性血管內皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人環孢A(CsA)
彩色豆馬勃大鼠堿性磷Anti-NLE1 Antibody人神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
釀酒酵母人干擾誘導蛋白10Anti-NMBR Antibody人神經膠質纖維性蛋白(GFAP)
軟骨肉瘤相關蛋白2抗體火木層孔菌人肝癌細胞（干細胞庫保藏）
腎結合蛋白抗體淺黃褐栓菌人間皮瘤細胞
環指蛋白211抗體#放射形土壤桿菌人髓母細胞瘤細胞Daoy（干細胞庫保藏）
RET指蛋白樣2/3抗體#需土節桿菌人小細胞肺癌
FGFR4抑制劑(FGF-401)大腸埃希 2-乙酰基吡抑制蛋白
殼蕉孢 馬鈴薯-蔗糖培養基磷化B
雜色尾孢 無機鹽瓊脂培養基纖溶抑制因子;凝血激活的纖溶抑制物
類動膠杜搟氏屬 卵黃雙抗培養基（EPV）白介10β
休哈塔假絲酵母休哈塔亞種 茴香二甲基縮前列腺E合2
大豆慢生根瘤 匹克氏肉湯基礎B6酮前列腺
解桿 亮綠乳糖膽鹽培養液（BGB）血栓
柑橘炭疽盤孢 基代磺早孕因子蛋白
大腸埃希 沙門氏成套生化鑒定管(SMGB)不飽和脂肪
喜鹽芽孢桿 霍亂弧成套生化鑒定管飽和脂肪
樟疫霉 沙門氏成套生化鑒定管(S)出血熱抗體
熱帶假絲酵母 蠟樣芽孢桿成套生化鑒定管2,3-二磷甘油
Microbacterium pumilum 單增李斯特氏成套生化鑒定管紅膜蛋白
斯氏假單胞 副溶血性弧成套生化鑒定管（SN/T0173-2010)Ⅰ型前膠原N端前肽
淡紫犁頭霉 O157成套生化鑒定管抗性磷
