RARα激動(dòng)劑(AM580)正在熱銷的產(chǎn)品：TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 腫瘤壞死因子-β抗原二, 含穩(wěn)定劑銅屑, 98%
TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1) 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原N,N-二酰 98%
TP53(tumor protein p53； Li-Fraum
中文名稱：RARα激動(dòng)劑(AM580)
英文名稱：AM580
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
貨號(hào)：FS-X10595
產(chǎn)品介紹:
AM580是一種穩(wěn)定的retinobenzoic衍生物，是RARα的激動(dòng)劑。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：102121-60-8 別名：CD336;NSC608001;Ro 40-6055 純度：99.41% 分子量：351.44 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸桿菌突觸結(jié)合蛋白12抗體Anti-PRLR Antibody角蛋白14(KRT14)
蕈青霉大腸桿菌志賀樣Ⅱ型突變體（O139菌型）抗體Anti-PRLR Antibody角蛋白13(KRT13)
高溫紫鏈霉菌泛連接Siah1抗體Anti-PRMT1 Antibody角蛋白12(KRT12)
褐球固氮菌磷化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體Anti-PRMT5 Antibody角蛋白10(KRT10)
鐮刀菌屬磷化5-脂氧合抗體Anti-PRMT1 Antibody角蛋白1(KRT1)
高加索奶乳桿菌磷化5-脂氧合抗體Anti-PRND Antibody焦磷2(PPA2)
柱黃曲霉應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體Anti-PRMT8 Antibody焦磷1(PPA1)
松口蘑抗腫瘤蛋白ANUP抗體Anti-PRNP Antibody膠質(zhì)系來(lái)源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)
賴芽胞桿菌屬小谷酰三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α抗體Anti-PRNP Antibody膠質(zhì)成熟因子γ(MPFγ)
巨大芽孢桿菌SUGT1蛋白抗體Anti-PRNP Antibody膠乳(LXN)
糞腸球菌紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體Anti-PRNP Antibody(PB0833)降鈣受體(CTR)
金灰青霉紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白2抗體Anti-PROC Antibody腱調(diào)蛋白(TNMD)
雞傷門氏菌轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體Anti-PROC Antibody腱蛋白樣蛋白1(CHRDL1)
球孢白僵菌核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體Anti-PROCR Antibody腱蛋白(CHRD)
釀酒酵母信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Anti-PROM1 Antibody堿性唾液脯豐富蛋白2(PRB2)
巨大芽孢桿菌 A核轉(zhuǎn)錄因子SOX6抗體Anti-PROK1 Antibody堿性唾液脯豐富蛋白1(PRB1)
胚胎神經(jīng)細(xì)胞NNAT抗體痰塔特姆氏菌小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)肽Y受體5抗體科氏葡萄球菌科氏亞種小鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞提取物
神經(jīng)肽Y受體4抗體單形擬桿菌小鼠腸微血管細(xì)胞提取物
螺旋環(huán)螺旋蛋白1+2抗體假結(jié)合棒桿菌小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
RARα激動(dòng)劑(AM580)細(xì)交鏈孢 硝鎂,六水單氧化
異常畢赤酵母 三氧化二鈦絲蛋白抑制劑
枯草芽孢桿 2-氨基-2'-氟-2'-脫氧腺M(fèi)AP激相互作用的絲;蘇激
皮諾卡氏 一氧化錳磷化MAP激相互作用絲,蘇激
桃色枝頂孢 硅幾丁質(zhì)
新月彎孢 2,3-二氟苯甲尿核輔
長(zhǎng)孢鏈霉 (1S)-(-)-樟腦烷尿核輔
黃絮鱗鵝膏 甲鈷甘氨酰脯二肽氨基肽
運(yùn)動(dòng)替斯崔納 4--2-膽固
水棲黃桿 11-疊氮-3,6,9-三氧雜十一烷-1-胰島樣生長(zhǎng)因子1
檸檬色短小桿 6,7-二氫-4-苯并[b]噻吩酮總蛋白
葡萄座腔 三（4-三氟甲苯基）膦1磷鞘氨
近緣彎孢 5'-O-[(二異基氨基)-(2-基乙氧基)氧磷基]-3'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)胸異檸檬脫氫
木糖氧化無(wú)色桿 Fmoc-(2-芐氧基羰基)賴磷
牛病性腹瀉病 2-亞氨基生物琥珀脫氫
