產(chǎn)品名稱 | GC-1 spg小鼠精原細胞系 | 貨號 | A01X1050 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | GC1spg:GC-1 spg |
分類 | 小鼠系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | GC-1spg |
種屬 | 小鼠 |
年齡（性別） | 10日齡 |
組織來源 | |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | Type B spermatogonia were immortalized by transfection with pSV3-neo (a plasmid containing coding sequences for the SV40 large T antigen and neomycin resistance) |
生物安全等級 | 2 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:4-1:6 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-2053 |
別稱公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品：
細胞應激反應蛋白抗體 英文名；SCARA3TIP60抗體 英文名；KAT5 / Tip60
細胞增殖誘導蛋白40抗體 英文名；DARSTMEFF1蛋白抗體 英文名；TMEFF1
細胞增殖誘導蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體 英文名；MAEATMEM15/跨膜蛋白15抗體 英文名；DOLK
細胞增殖誘導蛋白54抗體 英文名；PIG54/SCC112TMEM157蛋白抗體 英文名；TMEM157
細胞粘附分子1抗體 英文名；TSLC1TMTC1蛋白抗體 英文名；TMTC1
細胞粘附分子2抗體 英文名；CADM2TMUB2蛋白抗體 英文名；TMUB2
細胞粘附分子3抗體 英文名；CADM3TNRC18蛋白抗體 英文名；TNRC18
細胞粘附分子4抗體 英文名；Cell adhesion molecule 4TNRC6C 英文名；TNRC6C
細胞粘附分子CD112抗體 英文名；CD112Toll蛋白相互作用蛋白抗體 英文名；Tollip
細胞粘附分子伴侶蛋白1抗體 英文名；Sidekick 1Toll樣蛋白受體10抗體 英文名；TLR10/CD290
細胞粘附分子相關(guān)蛋白/癌基因下調(diào)蛋白抗體 英文名；CDONToll樣受體11抗體 英文名；TLR11
GC-1 spg小鼠精原細胞系細胞粘合素(固生蛋白)抗體 英文名；Tenascin CToll樣受體1抗體 英文名；TLR1
細胞粘合素/腱糖蛋白-C/固生蛋白抗體 英文名；Tenascin CToll樣受體2（CD282）單克隆抗體 英文名；TLR2
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
