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T25m2 小鼠神經元細胞提取物操作

參考價
面議
具體成交價以合同協議為準
  • 型號T25m2
  • 品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2021-06-21
  • 廠商性質經銷商
  • 入駐年限9
  • 實名認證已認證
  • 產品數量9300
  • 人氣值287544
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上海莼試生物技術有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology  Co. Ltd.  專業服務于生命科學領域,擁有分子生物學、醫學、藥學、化學等方面的科研技術團隊,經營科研生化試劑、分析試劑、實驗耗材,推出技術先進、質量穩定的科研產品。為全國乃至于世界各地科研機構、工業、電子、醫療、科技等領域的客戶,提供系統的產品資源及配套技術服務。推出十幾個種類產品線,部分產品接受定制服務!



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小鼠神經元細胞提取物操作如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
小鼠神經元細胞提取物操作 產品詳情

 

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1 HBV HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

規格

貨號

小鼠神經元細胞提取物操作

T25m2

CS-964112

小鼠神經元細胞提取物【Mouse Brain : Normal Neuron CellsDerivatives】小鼠神經元細胞提取物是從小鼠原代神經元細胞提取的,小鼠原代神經元細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mgRNA68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37,5%CO2  培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37,5%CO2  培養細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養箱濕度為70%-80%
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
1146-98-1  Bromindione (Fluidane)  50mg  Poliovirus(PV)脊髓灰質炎病毒通用型RT-LAMP試劑盒 

1146-99-2  Chlorindione (Chlophenadione)  100mg  Xenohaliotis californiensis加州立克次體LAMP試劑盒 

1146-99-2  Chlorindione (Chlophenadione)  10mM*1mLinDMSO  Xenohaliotis californiensis加州立克次體LAMP試劑盒 

114719-57-2  Fascaplysin (chloride)  1mg  California Encephalitis Virus加利福利亞腦炎病毒RT-LAMP試劑盒 

114719-57-2  Fascaplysin (chloride)  5mg  California Encephalitis Virus加利福利亞腦炎病毒RT-LAMP試劑盒
LS180細胞,結腸腺癌細胞 眼脈絡色素瘤細胞,MuM-2B細胞 腦星形膠質母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]阿普斯特;CC10004Apremilast;CC-10004質量規格:>98%,PDE4TNF-α抑制劑

HGC-27(胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2氨丁三醇(標準品)TRISTEARIN質量規格:鑒別

CD244 Others Human  2B4 / SLAMF / CD244 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸替扎尼定(標準品)Tizanidine 質量規格:HPLC法含量測定

肺微血管內皮細胞HPMECTubastatin A HCLTubastatin A 質量規格:>98%,HDAC6抑制劑

K Others Human  K Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸莫索尼定(標準品)Moxonidine 質量規格:含量測定
小鼠神經元細胞提取物操作胎盤羊膜細胞*培養基 100mL醋酸Hydrocortisone Acetate質量規格:>98.5%,BR

SAC-II B2細胞,小鼠腹水瘤細胞 BRL 3A(大鼠肝細胞) 皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1醋酸(標準品)Hydrocortisone Acetate質量規格:HPLC>98%,標準品

CCL11 Protein Human 重組 CCL11 蛋白 (His 標簽)鹽酸伊達比星IdarubicinHCl質量規格:含量960~1030µg/mg,USP30

RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸伊馬替尼Imatinib Mesylate質量規格:>99.0%,BR,可用于細胞培養

結膜細胞裂解物HConFL甲磺酸伊馬替尼(標準品)Imatinib Mesylate質量規格:HPLC>98%,標準品

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