使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
公司細胞現貨供應，質量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務，同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 乳腺癌細胞：MDA-MB-468 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
分類 | 細胞系 |
貨號 | GOY-01X0288 |
商品介紹：
名稱 乳腺癌細胞：MDA-MB-468 別稱MDA-MB 468; MDA-MB468; MDAMB468; MDA-468; MDA468; MB468; MD Anderson-Metastatic Breast-468 種屬人類 年齡（性別）女性，51歲 組織來源乳腺；乳房；腺癌 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述MDA-MB-468細胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合，但MDA-MB-468細胞始終表現為G6PD A表型。p53MDA-MB-468細胞是由Cailleau·R等人于1977年從一位患有轉移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合，但MDA-MB-468細胞始終表現為G6PD A表型。p53基因273位密碼子存在G→A突變，從而導致Arg→His替代。每個MDA-MB-468細胞上存在1×10^6個EGF受體。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~36-62小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，100% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5).) 受體表達情況epidermal growth factor (EGF); transforming growth factor alpha (TGF alpha) 抗原表達情況Blood Type AB; HLA Aw23, Aw30, B27, Bw35, Cw2, Cw4 (patient) 注意事項1、該細胞推薦使用Leibovitz's L-15培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，Leibovitz's L-15不可以通入二氧化碳，會產生細胞毒性； 2、如您沒有無二氧化碳的培養(yǎng)箱，可使用DMEM替代Leibovitz's L-15，使用DMEM培養(yǎng)基時即可正常通入5%二氧化碳； 2、配套專用培養(yǎng)基默認Leibovitz's L-15配置，如需DMEM配方，請聯系銷售下單備注更改。 |
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人 CA XII 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 CA II 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
人 CA II 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 TRAILR1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
人 PTP1B / PTPN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
人 CA IX 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
人 CA IX 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠 IL10 基因全長
乳腺癌細胞：MDA-MB-468 phospho-IRS1(Ser302) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CDKN2B/p15 INK4b 細胞周期蛋白依賴性激抑制劑2B抗體 規(guī)格: 0.2ml
Exportin 5 核輸出蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2ml
APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 規(guī)格: 0.1mlFOXN1 叉蛋白N1抗體 規(guī)格: 0.2ml
GNRPX/PLEKHJ1 核苷酸結合蛋白X抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Bio 標記的兔抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.3ml
Secretin receptor 分泌素受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
25次 一站式全血mRNAout One-Stop Blood mRNA Isolation Kit 4℃保存
1瓶 ES-2細胞株 ES-2 低溫運輸和保存
阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基
30次 環(huán)狀DNA全基因組擴增試劑盒 Circular DNA WGA Kit -20℃保存
2 ug pCo Hygro pCo Hygro 低溫運輸，-20℃保存
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管） Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包
