選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa試劑盒
英文名稱(chēng)：Rat annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類(lèi)型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周?chē)着c中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過(guò)猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Kuraishia capsulata 號(hào): 50525-27-4
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Variovorax boronicumulans 號(hào): 50525-27-4
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA) Kit，48T/96T 拉丁屬名: 芽孢乳酸菌干粉 號(hào): 50528-80-8
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 號(hào): 50528-80-8
人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP) Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用 號(hào): 50530-12-6
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus 號(hào): 50530-12-6
小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces hebeiensis 號(hào): 50541-93-0
雞血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 用途: 能與我國(guó)栽培大豆共生固氮 號(hào): 50541-93-0
人血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 拉丁屬名: coli 號(hào): 50541-93-0
小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae 號(hào): 505-66-8
血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用 號(hào): 505-66-8
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Gluconacetobacter sp. 號(hào): 505-73-7
兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4) Kit，48T/96T 拉丁屬名: Aspergillus versicolor 號(hào): 505-73-7
人α半乳糖苷酶(αGAL) Kit，48T/96T 用途: 生物防治 號(hào): 50583-51-2
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1) Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用 號(hào): 50594-78-0
人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgG（HSVⅡ-Ab）分析檢測(cè)試劑盒Human CXCL17 KitAlias: CXCL17KitReactivity: HumanRange: Required
人白介素1可溶性受體Ⅱ（IL-1sRⅡ）分析檢測(cè)試劑盒Human DEFB121 KitAlias: DEFB121KitReactivity: HumanRange: Required
人白介素18結(jié)合蛋白（IL-18BP）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJB11 KitAlias: DNAJB11KitReactivity: HumanRange: Required
人白介素15（IL-15）分析檢測(cè)試劑盒Human CTRP6 KitAlias: CTRP6KitReactivity: HumanRange: Required
人白介素-12受體（IL-12R）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJB4 KitAlias: DNAJB4KitReactivity: HumanRange: Required
人阿立新A（Orexin A）分析檢測(cè)試劑盒Human Cyclin T1 KitAlias: CyclinT1KitReactivity: HumanRange: Required
人γ分泌素激活蛋白（PION）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) KitAlias: DNAJBKitReactivity: HumanRange: Required
人β-防御素1（DEFB1）分析檢測(cè)試劑盒Human CYGB(Cytoglobin) KitAlias: CYGB|cytoglobin|HGB|Histoglobin|STAPKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/ml
人α2抗纖溶酶（α2-AP）分析檢測(cè)試劑盒Human Cytohesin 1 KitAlias: Cytohesin1KitReactivity: HumanRange: Required
人α1微球蛋白/bikunin前體（AMBP）分析檢測(cè)試劑盒Human DOCK180 KitAlias: DOCK180KitReactivity: HumanRange: Required
人T細(xì)胞活化連接蛋白（LAT）分析檢測(cè)試劑盒Human DAPK1 KitAlias: DAPK1KitReactivity: HumanRange: Required
人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2（SMOC2）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJC2/MPP11 KitAlias: DNAJC2Kit,MPP11KitReactivity: HumanRange: Required
人P選擇素（P-Sectin/CD62P）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) KitAlias: DNAJBKitReactivity: HumanRange: Required
人P0蛋白抗體（IgG）分析檢測(cè)試劑盒Human DCBLD2 KitAlias: DCBLD2KitReactivity: HumanRange: Required
人G蛋白偶聯(lián)受體109A（GPR109A）分析檢測(cè)試劑盒Human DOCK180 KitAlias: DOCK180KitReactivity: HumanRange: Required
人GAD/IA2自身抗體分析檢測(cè)試劑盒Human Cytohesin 1 KitAlias: Cytohesin1KitReactivity: HumanRange: Required
人EB病毒早期抗原（EBEA）抗體（IgG）分析檢測(cè)試劑盒Human DNAJC2/MPP11 KitAlias: DNAJC2Kit,MPP11KitReactivity: HumanRange: Required
人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體（EJ/GlyRS）分析檢測(cè)試劑盒Human DAPK1 KitAlias: DAPK1KitReactivity: HumanRange: Required
大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa試劑盒人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體 載玻片細(xì)胞P16蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒DL-組氨酸鹽酸鹽 BR卵泡抑素（FS）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)免疫試劑盒CWF19L1蛋白抗體 載玻片細(xì)胞P21蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒DL-高氨酸 98%表沒(méi)食子兒茶素（EGC） Epigallocatechin人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒心動(dòng)加速蛋白多肽抗體 載玻片細(xì)胞P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒DL-異亮氨酸 98%L-酪氨酸叔丁酯人胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體(IGF-2R)免疫試劑盒通道相互作用蛋白3抗體 載玻片細(xì)胞P35蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒D-異亮氨酸 98%BOC-L-谷氨酸人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)免疫試劑盒12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29抗體 載玻片細(xì)胞P38蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒D-別異亮氨酸 98%人抑瘤素M（OSM）ELISA試劑盒,OSM ELISA kit人胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)免疫試劑盒12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體 載玻片細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒DL-亮氨酸 98%人抗Mi2抗體（anti-Mi2-Ab）ELISA試劑盒, anti-Mi2-Ab ELISA k人胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體 載玻片細(xì)胞PAR-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒L-叔亮氨酸 99%人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白（PTHrP）ELISA試劑盒,PTHrP ELISA人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 載玻片細(xì)胞PAR-3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒DL-賴(lài)氨酸 99%人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白（aFABP）ELISA試劑盒,aFABP ELISA
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
